透射电镜实验报告

一、样本情况和仪器：

电镜厂家及型号：FEI捷克有限公司，型号Tecnai G2 Spirit

二、透射电镜操作流程：

前固定-- 2.5%戊二醛固定4小时以上，4℃保存（或送电镜室）。
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清洗（1）PBS缓冲液 10～15分钟，3次。
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后固定-- 1%四氧化锇1~2小时, 4℃冰箱保存。
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清洗（2）同清洗（1）
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脱水----梯度酒精脱水：50%、70%、80%、90%，各10～15分钟/次，
100%10～15分钟，2次。

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脱水----丙酮脱水：100%10～15分钟，2次

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浸透----100%丙酮：包埋液=3: 1 室温 0.5h
100%丙酮：包埋液=1: 1 室温4h

纯包埋液 4℃过夜

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包埋----用包埋剂将样品包埋在胶囊或包埋板里。
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聚合----置入烤箱：40℃，24小时；60℃，48小时。
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超薄切片----用超薄切片机Leica UC7将样品切成厚约100nm 的超薄切片。
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电子染色----醋酸双氧铀20分钟，柠檬酸铅10分钟。
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透射电镜观察照相

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